Se encuentra en la leche de los mamíferos. En la de vaca se encuentra aproximadamente en un 5%.
Al coagular la leche, queda un líquido, el suero, de donde se puede separar la lactosa por evaporación. Es un sólido blanco, menos dulce que la sacarosa. Por hidrólisis produce una molécula de beta galactosa otra de alfa glucopiranosa:
Por la presencia de oxhidrilo del carbono 1 en la unidad glucosa, este disacárido tiene poder reductor, por análoga razón a la explicada en el caso de la maltosa. La unión es β(1➝4).